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兩種測定TRAb方法的比較
更新時(shí)間:2022-08-15   點(diǎn)擊次數(shù):1852次



人們普遍認(rèn)為Graves?。℅D)是一種自身免疫性疾病,甲亢是由于TSHR刺激性自身抗體引起的[1]。TSHR自身抗體(TRAb)根據(jù)不同的方法檢測,可以得到甲狀腺刺激性抗體(TSAb)、TSH結(jié)合抑制抗體(TBII)和甲狀腺阻斷性抗體(TSBAb)的結(jié)果。


多年來,大多數(shù)檢測都是以可溶性豬TSHR為配體,通過促甲狀腺激素結(jié)合抑制試驗(yàn)來完成檢測[2]。隨后,兩種針對TSH結(jié)合抑制抗體(TBII)的兩步檢測法被引入,一種是使用豬TSHR的包被板ELISA法(CP檢測),另一種是使用人TSHR的包被管測定(CT檢測)。據(jù)報(bào)道,這兩種方法的靈敏度和特異性都很高[3,4]。這是第一份比較使用豬TSHR的CP檢測法和使用人TSHR的CT檢測法的報(bào)告,兩種方法檢測來自甲狀腺毒癥和橋本甲狀腺炎患者的相同血清樣本。





研究目的


本研究的目的是比較兩種兩步檢測法的性能,一種是使用純化豬促甲狀腺激素受體(豬TSHR)包被板(coated plate,CP)的ELISA檢測法(TRAb ELISA),另一種是使用重組人促甲狀腺激素受體(人TSHR)包被管(coated tube,CT)的放免檢測法。



豬TSHR的CP酶免檢測是據(jù)已發(fā)表的方法測定的(該方法縮寫為ELISA)[4]。在人TSHR的CT放免檢測(縮寫為CT法)中,根據(jù)ROC曲線獲取的陽性抑制率臨界值為20%(靈敏度為99.0%,特異性為98.8%)。TSAb根據(jù)已發(fā)表的文獻(xiàn)[5]進(jìn)行檢測,臨界值為180%。TSBAb的正常結(jié)果是小于40%。


TgAb和TPOAb用RIA(Cosmic公司,日本)測定,正常值均為小于0.3 U/mL。


檢測對象


患者的樣本在Kamijo甲狀腺診所收集。所有樣本采集后立即凍存,編碼并進(jìn)行連續(xù)檢測(2個(gè)重復(fù))。診斷依據(jù)的是臨床癥狀,TSH,F(xiàn)T4,F(xiàn)T3,甲狀腺超聲,锝閃爍顯像技術(shù)(Tc-99)和其他血清學(xué)數(shù)據(jù)。


檢測對象:100例未經(jīng)治療的Graves?。℅D)患者、30例無痛性甲狀腺炎(PT)患者、10例亞急性甲狀腺炎(SAT)患者和87例橋本甲狀腺炎(HT)患者。


結(jié)果

在100例未經(jīng)治療的GD患者中,除一例外,其他患者血清中的TBII(TRAb)均呈現(xiàn)ELISA和CT放免法雙陽性。


在30例PT患者血清中,1例呈ELISA單項(xiàng)陽性,4例呈CT法單項(xiàng)陽性。在1例ELISA和CT法雙陽性的PT病例中,甲狀腺功能亢進(jìn)繼發(fā)于PT,但其余的PT病例(3例CT法單陽)并未觀測到相關(guān)現(xiàn)象。


在10例SAT患者中,有1例CT法陽性,但ELISA為陰性。


在87例HT患者中,9例為ELISA陽性(包含1例單項(xiàng)陽性),10例為CT法陽性(包含2例單項(xiàng)陽性)。


在甲狀腺毒癥鑒別和HT患者的陽性檢出率上,兩種檢測方法的靈敏度和特異性基本一致,因此可以合理得出結(jié)論:在臨床應(yīng)用中,兩種檢測方法的高靈敏度可能來自方法學(xué)本身,這可能緣于兩種方法學(xué)排除了TSH抗體和異嗜性抗體HAMA的影響,而與使用的促甲狀腺激素受體(TSHR)的種源無關(guān)。






圖1顯示了未接受治療的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者血清中ELISA(A)和CT法(B)的值。



在11例TRAb抗體陽性的HT患者中,4例血清樣本缺失,因此我們總結(jié)剩余7例患者的臨床資料和血清檢測結(jié)果,見表1。這7例患者中,其中5例ELISA陽性?;颊哐錞gAb和TPOAb均較高或相對較高。同時(shí),7例患者中,6例TSAb陽性,4例TSBAb陽性。7例患者中,6例表現(xiàn)為橋本氏甲亢。




討論

為了比較這兩種檢測方法,在未經(jīng)治療的GD患者、PT患者、SAT患者和HT患者中,使用了相同的血清樣本進(jìn)行測定。在未經(jīng)治療的GD組中使用兩種檢測法測定同一組血清樣品,靈敏度為99%。作者報(bào)道[4],在未經(jīng)治療的GD組中,與傳統(tǒng)基于豬TSHR的TBII檢測相比,使用豬TSHR的ELISA檢測具有更高的靈敏度,特異性無差異,Costsagllola等[3]在使用人TSHR的CT檢測時(shí)也有類似結(jié)論報(bào)道。事實(shí)上,使用商品化檢測產(chǎn)品(TRAb-III,Cosmic公司,東京)對本研究中100例未經(jīng)治療的GD患者的血清進(jìn)行檢測,96例呈TBII陽性[4]。


接下來在PT和SAT患者中對比了ELISA和CT法。雖然在本研究中,PT和SAT患者在兩種檢測方法的陽性檢出率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但在本組患者中CT法比ELISA有更高的陽性傾向。正如本研究和以前的報(bào)告中顯示的自身免疫性甲狀腺炎患者那樣,ELISA和CT法的活性在TSAb和TSBAb之間沒有區(qū)別[6,7]。


總之,這些發(fā)現(xiàn)提示在未經(jīng)治療的GD組中,新的ELISA和CT檢測方法在臨床應(yīng)用中的高靈敏度可能源于方法學(xué)本身,推測為TSHR包被板或包被管排除了抗TSH抗體和異嗜性抗體HAMA對檢測系統(tǒng)的影響。Feldt-Rasmussen等[8]曾報(bào)道過,傳統(tǒng)的TBII檢測并不能預(yù)測個(gè)體患者的緩解或復(fù)發(fā),但現(xiàn)在用上述兩種檢測方法(ELISA和CT檢測方法)可以對個(gè)體患者的緩解或復(fù)發(fā)趨勢進(jìn)行重新評(píng)估。



參考文獻(xiàn):Kamijo K. TSH-receptor antibody measurement in patients with various thyrotoxicosis and Hashimoto's thyroiditis: a comparison of two two-step assays, coated plate ELISA using porcine TSH-receptor and coated tube radioassay using human recombinant TSH-receptor. Endocr J. 2003 Feb;50(1):113-6. doi: 10.1507/endocrj.50.113. PMID: 12733717.





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