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　　TRAb ELISA試劑盒制備簡(jiǎn)單，含針對(duì)抗原的多種決定簇，但抗體的親和力和特異性相對(duì)要低于單抗，且每次制備的抗體在其親和力和特異性上均有區(qū)別。單克隆抗體(單抗)：可無(wú)限大量的得到針對(duì)單一決定簇的抗體，缺點(diǎn)是結(jié)合的單一性。當(dāng)建立雙抗夾心ELISA測(cè)定方法時(shí)，如包被和指示抗體使用同一單抗，則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏，很容易造成假陰性結(jié)果，尤其是在使用一步法時(shí)“鉤狀”效應(yīng)(Hookeffect)的出現(xiàn)。因此，在使用單抗建立雙抗夾心ELISA方法時(shí)，包被和指示抗體常使用針對(duì)抗原的不同決定簇的單抗，包被抗體可為混合單抗，從而使得固相抗體在免疫測(cè)定中能更為*地結(jié)合待測(cè)物中的特異抗原。
 

　　TRAb ELISA試劑盒使用的相關(guān)操作技巧如下：
 

　　1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
 

　　2.合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
 

　　3.在吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
 

　　4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
 

　　5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
 

　　6.為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
 

　　7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
 

　　8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗。
 

　　9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
 

　　10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。